Histophilus somni (Haemophilus somnus) aislado en casos de problemas del aparato reproductor de ganado lechero. Primer informe en México

Histophilus somni (Haemophilus somnus) has been recognized as an important pathogen of cattle, associated with reproductive disorders such as vaginitis, endometritis, infertility, and abortion. The purpose of this research was to determine whether H. somni is found in dairy cattle with reproductive tract disease. Convenience sampling was performed in 6 dairies located in central Mexico. Vaginal exudate samples were obtained from 67 cows with reproductive tract disease and from 45 clinically healthy cows. Samples were seeded in chocolate agar then incubated at 37 °C for 24 to 48 h with 10% CO2. Field isolates were characterized using biochemical tests, total protein profile electrophoresis, immunotransference (Western blot), and PCR. An ATCC reference strain was used at all times as a positive control. From a total of 112 animals sampled, 10 (8.9%) H. somni isolates were obtained. Isolates were recovered only from cows with reproductive tract disease, representing 14 % (10/67) within this group. The organism was not isolated from any of the 45 clinically healthy cows. This is the first report of the presence of H. somni in dairy cattle with reproductive disorders in MexicoHistophilus somni (Haemophilus somnus) es reconocido como un patógeno importante de los bovinos, asociado a desórdenes reproductivos como vaginitis, endometritis, infertilidad y aborto. El objetivo del presente trabajo fue determinar si H. somni se encuentra presente en vacas lecheras con enfermedades del aparato reproductor. Se realizó un muestreo de conveniencia en seis establos de la zona central de México, en donde se colectaron muestras de exudado vaginal de 67 vacas enfermas del tracto reproductor y de 45 vacas clínicamente sanas. Las muestras fueron inoculadas en Agar Chocolate e incubadas a 37 °C durante 24 a 48 h con 10 % de CO2. Para la identificación de las cepas de campo se realizaron pruebas bioquímicas, perfiles de proteínas totales por electroforesis, inmunotransferencia y la prueba de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR), siempre se utilizó como control positivo una cepa de referencia de la ATCC. De un total de 112 animales muestreados, se recuperaron 10 cepas de Histophilus somni (8.9%). Las cepas fueron recuperadas únicamente de vacas enfermas del aparato reproductor y representaron un 14 % (10/67) de aislamientos dentro de este grupo. De las 45 vacas clínicamente sanas muestreadas, no se obtuvo ningún aislamiento de este microorganismo. Este es el primer informe en México de la presencia de Histophilus somni en vacas lecheras con padecimientos del aparato reproductor

Insulin-like growth factor 1 (IGF-1) concentrations in synovial fluid of sound and osteoarthritic horses, and its correlation with proinflammatory cytokines IL-6 and TNF

El factor de crecimiento similar a la insulina I (IGF-1) es el factor de crecimiento conocido más importante para la reparación del cartílago en caballos. Promueve la mitosis de los condrocitos, la expresión de colágeno II y la producción de matriz extracelular. La osteoartritis (OA) es la condición musculoesquelética más común que causa cojera y bajo rendimiento en caballos deportivos. Se evaluó clínica y radiográficamente un total de 11 caballos cojos, y se confirmó que todos sufrían una cojera metacarpofalángica frontal mediante una prueba de flexión positiva, un bloqueo nervioso en 4 puntos bajos y un bloqueo intraarticular. La proteína total, IGF-1, IL-6 y TNFα se determinaron por ELISA, lo que demostró cambios y diferentes correlaciones entre la condición clínica, los cambios radiográficos y el grado de inflamación. Todos los caballos con dolor asociado a las articulaciones y, por lo tanto, asociado a la cojera, mostraron un aumento significativo de la proteína total (P<0.0001) y la concentración de IGF-1 (P<0.05). Las concentraciones de IL-6 y TNFα entre los controles y los caballos cojos mostraron diferencias significativas (P<0.01 y P<0.001 respectivamente). Los caballos con menos cambios radiográficos mostraron la mayor expresión de IGF-1 en el líquido sinovial, y los caballos con condiciones de OA más crónicas tuvieron niveles de expresión de IGF-1 muy similares a los de las articulaciones de control. En todas las articulaciones cojas, se identificó por medio de Western blot una isoforma de IGF-1 más ligera (~ 7.5 kDa) que estaba relacionada con la inflamación y es el peso molecular del péptido maduro, y todas las articulaciones de control expresaron una isoforma más pesada (~ 12 kDa). Este hallazgo podría conducir a una nueva investigación para secuenciar y apuntar a la isoforma que no se expresa durante un proceso inflamatorio dentro de una articulación, y para tener una mejor comprensión de su papel en la articulación del caballo.Insulin-like growth factor I (IGF-1) is the most important known growth factor for cartilage repair in horses. It promotes mitosis of chondrocytes, collagen II expression, and extra cellular matrix production. Osteoarthritis (OA) is the most common musculoskeletal condition that causes lameness and poor performance in sport horses. A total of 11 lame horses were clinically and radiographically evaluated, and all were confirmed to suffer a front metacarpophalangeal lameness by a positive flexion test, a low-4-point nerve block and an intraarticular block. Total protein, IGF-1, IL-6 and TNFa were determined by ELISA, demonstrating changes and different correlations between clinical condition, radiographic changes and degree of inflammation. All horses with joint associated pain and therefore associated lameness, demonstrated a significant increase of total protein (P<0.0001) and IGF-1 concentration (P<0.05). Concentrations of IL-6 and TNFa between controls and lame horses demonstrated significant differences (P<0.01 and P<0.001 respectively). Horses with less radiographic changes, demonstrated the highest IGF-1 expression in synovial fluid, and horses with more chronic OA conditions had very similar IGF-1 expression levels than control joints. In all lame joints, it was identified by Western blot a lighter isoform of IGF-1 (~7.5 kDa) which was inflammation related and it is the molecular weight of the mature peptide, and all control joints expressed a heavier isoform (~12 kDa). This finding could lead to new research for sequencing and targeting the isoform which is not expressed during an inflammatory process within a joint, and to have a better understanding of its role in the horse’s joint

Histophilus somni (Haemophilus somnus) aislado en casos de problemas del aparato reproductor de ganado lechero. Primer informe en México

Histophilus somni (Haemophilus somnus) es reconocido como un patógeno importante de los bovinos, asociado a desórdenes reproductivos como vaginitis, endometritis, infertilidad y aborto. El objetivo del presente trabajo fue determinar si H. somni se encuentra presente en vacas lecheras con enfermedades del aparato reproductor. Se realizó un muestreo de conveniencia en seis establos de la zona central de México, en donde se colectaron muestras de exudado vaginal de 67 vacas enfermas del tracto reproductor y de 45 vacas clínicamente sanas. Las muestras fueron inoculadas en Agar Chocolate e incubadas a 37 °C durante 24 a 48 h con 10 % de CO2. Para la identificación de las cepas de campo se realizaron pruebas bioquímicas, perfiles de proteínas totales por electroforesis, inmunotransferencia y la prueba de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR); siempre se utilizó como control positivo una cepa de referencia de la ATCC. De un total de 112 animales muestreados, se recuperaron 10 cepas de Histophilus somni (8.9%). Las cepas fueron recuperadas únicamente de vacas enfermas del aparato reproductor y representaron un 14 % (10/67) de aislamientos dentro de este grupo. De las 45 vacas clínicamente sanas muestreadas, no se obtuvo ningún aislamiento de este microorganismo. Este es el primer informe en México de la presencia de Histophilus somni en vacas lecheras con padecimientos del aparato reproductor

Evaluación en campo de un inmunógeno de Pasteurella haemolytica en corderos

En el presente, trabajo se evaluó la eficacia e inocuidad en campo de un inmunógeno a base de bacterias vivas de Pasteurella haemolytica en corderos

Distribution of β-galactosidase by adenoviral transfer as a model for intralymphonodal gene therapy in dogs with spontaneous multicentric lymphosarcoma

La terapia génica en cáncer se administra principalmente por vía intravenosa e in situ mediante el empleo de vectores virales y no virales. La administración sistémica del vector transfiere el gen terapéutico al tejido neoplásico, pero también a otros órganos. El objetivo de este estudio fue evaluar la distribución de expresión del gen reportero Lac Z insertado en un vector adenoviral y administrado vía intralinfonodal (ILN) en perros con linfosarcoma multicéntrico espontáneo. La distribución de la expresión de la proteína β-galactosidasa de un adenovirus no replicativo recombinante (Adβ-gal) fue evaluada 72 h después de su administración ILN en 6 perros con linfosarcoma multicéntrico espontáneo mediante la exposición al sustrato cromogénico Xgal. Se emplearon dosis de 0 (control), 1,35 X 10^10, 2,53 X 10^10, 6,10 X 10^10, 18,38 X 10^10, y 153,85 X 10^10 partículas virales (PV)/kg. La expresión se presentó en un 100% del tejido linfocítico neoplásico que incluye, linfonodos y bazo, con menor intensidad se expresó en órganos infiltrados con linfocitos neoplásicos: hígado, médula ósea y pulmones. La expresión de β-gal fue exclusiva en tejido linfocítico neoplásico y en sitios de metástasis. Esto permite mejorar la eficiencia en la transferencia del gen terapéutico con menores dosis y reducir los riesgos de toxicidad y también potencialmente menos inmunogénico. La terapia génica adenoviral vía intralinfonodal tiene un elevado potencial para su aplicación en animales y humanos con linfosarcoma y también para metástasis linfonodales.464 - 472BimestralGene therapy administration in cancer is mainly performed by intravenous, oral, and in situ routes, with viral or nonviral delivery vector systems. Systemic administration frequently transfers the therapeutic gene to neoplastic tissue and as well as to other organs. The objective of this study was to evaluate the distribution expression of Lac Z reporter gene by adenoviral transfer administered by intralymphonodal route (ILNR) in dogs with lymphosarcoma. The distribution of β-galactosidase protein expression by a non replicative recombinant adenovirus (Adβ-gal) delivery was determined in six dogs with spontaneous multicentric lymphosarcoma, 72 h after ILNR administration using X-gal chromogenic substrate. The doses administered were 0 (control), 1.35 X 10^10, 2.53 X 10^10, 6.10 X 10^10, 18.38 X 10^10 and 153.85 X 10^10 viral particles (VP) /kg. The expression was manifested in 100% of lymphocytic tissue, including lymph nodes and spleen. The infiltrated organs with neoplastic lymphocytes: liver, bone marrow and lungs were positive but with lower intensity. Conclusion. The expression of β-gal was restricted to neoplastic lymphocytic tissue and metastatic sites. The ILNR would enhance gene therapy efficacy to a specific cell type and permit the delivery of lower doses, which result in reduced toxicity and may also potentially be less immunogenic. This suggests that adenoviral gene therapy by ILNR is a potential model of administration in animals and human beings with lymphosarcoma and also for metastasis to lymph nodes

Frecuencia de M. hyopneumoniae, M. hyorhinis y M. hyosynoviae en muestras nasales y de pulmón de cerdos con síntomas de neumonía enzoótica porcina

M. hyopneumoniae, M. hyorhinis and M. hyosynoviae are genetically related species of the genus Mycoplasma that affect pig production. The objective of this work was the isolation and identification by PCR of M. hyopneumoniae, M. hyorhinis and M. hyosynoviae from nasal swabs and lung samples of pigs from different regions of Mexico in order to determine the frequency of these species and to evaluate PCR as a diagnostic tool for PEP. Pigs aged 4 to 8 weeks with clinical diagnosis of PEP were included. Lung samples and nasal swabs were obtained for the isolation of the Mycoplasma in liquid Friis medium and identified by species-specific PCR based on the 16S rRNA subunit. Isolation was achieved in 37.11 % (36/97) of the samples. The three Mycoplasma species were identified in lung and nasal swab samples. Mycoplasma co-infection was identified in 27.77 % (10/36). The bacterial genera associated with Mycoplasma infections were E. coli, Bordetella, Enterobacter, SCN, Corynebacterium, Pasteurella, Streptococcus, Shigella and Klebsiella. Mixed infection was present in 26 nasal swabs (45.61 %) and absent in the lungs. It was concluded that the frequency of  Mycoplasma on  production  farms  was higher  than  expected (40.27 %). It was also identified other Mycoplasma species involved in the development of PEP. Therefore, surveillance through isolation and molecular techniques can be of great help to breeding stock providers, as well as for removing Mycoplasma from pig farms.M. hyopneumoniae, M. hyorhinis y M. hyopsynoviae son especies genéticamente relacionadas del género Mycoplasma que afectan la producción porcina. El objetivo de este trabajo fue el aislamiento e identificación por PCR de M. hyopneumoniae, M. hyorhinis y M. hyosynoviae a partir de hisopos nasales y muestras de pulmón de cerdos de diferentes regiones mexicanas para determinar la frecuencia de estas especies y evaluar la PCR como herramienta diagnóstica para NEP. Se incluyeron cerdos de 4 a 8 semanas con diagnóstico clínico de NEP. Se obtuvieron muestras de pulmón e hisopos nasales para el aislamiento de Mycoplasma en medio Friis líquido y se identificaron mediante la PCR especie-específica basada en la subunidad 16S rRNA. El aislamiento se logró en 37.11 % (36/97) muestras. Las tres especies de Mycoplasma se identificaron en muestras de pulmón e hisopos nasales. La co-infección por Mycoplasma se identificó en el 27.77 % (10/36). Los géneros bacterianos asociados a las infecciones por Mycoplasma fueron E. coli, Bordetella, Enterobacter, SCN, Corynebacterium, Pasteurella, Streptococcus, Shigella y Kebsiella. La infección mixta estuvo presente en 26 hisopos nasales (45.61 %) y ausente en pulmones. Se concluyó que la frecuencia de Mycoplasma en las fincas de producción fue mayor a la esperada (40.27 %). También se identificaron otras especies de Mycoplasma involucradas en el desarrollo de la NEP. Por lo tanto, la vigilancia asistida por el aislamiento y las técnicas moleculares pueden ser de gran ayuda para la eliminación de Mycoplasma de las explotaciones porcinas y para los proveedores de pie de cría